南方试管捐卵_试管婴费用_r9zXP_广东地区十个婚检有九个都是地贫吗？_tjH9w_1W

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广东地区不是十个婚检九个都是地贫（地中海贫血），但是广东地区地贫发病率的确比其他省份高位居全国之首，地贫是一种遗传性疾病，导致地贫的原因很复杂也很多样。通常来讲是因为基因的缺陷导致，如果父母双方都是携带至会有很大几率遗传给孩子。

虽然没有“十个婚检有九个都是地贫”那么夸张，但不得不说地中海贫血（简称地贫）是广东省高发的遗传病之一，据广东省地贫防控项目基线调查数据显示，广东户籍人口中地贫基因携带率约16.8%，同型地贫基因夫妇约占2%。如果夫妻为同型地贫基因携带者，每次怀孕其子女则有1/4的概率为重型地贫患者。

我国“地贫”的高发地区包括：广东、广西、海南、云南、福建、四川、重庆、湖南、江西、贵州等10个省市，我国南方各省的地贫基因携带率为1-23%，其中携带率最高的省是广西省，高达20%左右，广东省为10%左右。

而广西、广东之所以会成为地中海贫血的高发地区其实有2点原因，首先都知道地贫和贫血区别不一样，而地中海贫血之所以会出现一个较强的地域性，这就跟它与遗传有着很强的联系有关，这就跟它与遗传有着很强的联系有关。

ELISA样本制备指南及注意事项

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定义及介绍

ELISA（enzyme linked immunosorbent assay，酶联免疫吸附测定）是最基础的免疫学实验之一，其理论基础是抗原抗体的特异性反应。ELISA因其特异性强、灵敏度高、稳定性好而被广泛使用。ELISA试剂盒检测样品包括血清、血浆、细胞培养上清、灌洗液或尿液等生物样本，实验操作步骤并不繁琐，但实验完成后需要把样本检测结果OD值转化为浓度值，从而供下一步分析所用，因此样品的预处理对于后续数据处理和结果分析非常重要。

样本制备指南

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血清

全血样品于室温放置2小时或2-8℃过夜后于2-8℃，1000×g离心20min，取上清即可检测。收集血液的试管应为一次性的无内毒素试管。避免使用溶血，高血脂样品

2.血浆

抗凝剂推荐使用EDTA-Na

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，样品采集后30min内于2-8℃，1000×g离心15min，取上清即可检测。

3组织匀浆/组织全蛋白

用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液，称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中，在冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行反复冻融或超声破碎。最后将匀浆液于2-8℃，5000×g离心5-10min，取上清检测。

其余方法：在分析天平（AL204型）上，称量50-100mg组织样本。在样本中加入5倍质量体积的含1%PMSF的1×PBS缓冲液；并用小剪刀等工具将组织样本剪碎（尽可能小块）。注：1×PBS缓冲液使用前，需加入PMSF，现用现加，PMSF终浓度为1mM。打开超声破碎仪，将超声破碎仪的功率调至25%，超声时间2s，间隔时间5s，总时间2min。放入样本，冰上超声3min。视样本匀浆情况调整总时长。超声完成后，将样本放于4℃或冰上裂解30min。打开离心机，将转速调至12000×g；将样本放入离心机，离心10min，取上清，按需要分装，于-20℃贮存。注：留取20μL样本，用于后续BCA法测定样本蛋白含量。

组织匀浆液或组织全蛋白中的蛋白浓度对于检测实验的影响至关重要，建议样本蛋白浓度至少1mg/mL以上，较低浓度蛋白的组织匀浆液有可能导致ELISA检测失败。

4.细胞提取液

贴壁细胞

用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g离心5min后收集细胞；

悬浮细胞

可直接离心收集。收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每10

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个细胞中加入150-200μLPBS重悬(推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂；若含量很低可减少PBS的体积)并通过反复冻融或超声使细胞破碎。将提取液于2-8℃，1500×g离心10min，取上清检测。注：留取20μL样本，用于后续BCA测定。

其余方法：

对于

贴壁细胞

：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。以2百万细胞为例，在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液，震荡混匀细胞，4℃或冰上裂解30min。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。必要时可以进行超声处理，超声步骤与组织样本相同。

对于

悬浮细胞

：离心收集细胞，以2×10

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细胞为例，在样本中加入100μL的含1%PMSF的1×PBS缓冲液，震荡混匀细胞，4℃或冰上裂解30min。用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成（5-10）×10

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细胞/管，然后再裂解。必要时可以进行超声处理，超声步骤与组织样本相同。注：1×PBS缓冲液使用前，需加入PMSF，现用现加，PMSF终浓度为1mM。打开离心机，将转速调至12000×g；将样本放入离心机，离心10min，取上清，按需要分装，于-20℃贮存。注：留取20μL样本，用于后续BCA法测定样本蛋白含量。

5.细胞培养上清或其他生物体液

收集液体后于2-8℃，1000×g离心20min，除去杂质及细胞碎片。取上清检测。注：因细胞培养基中的胎牛血清影响或其他生物体液中杂蛋白的影响，不建议进行BCA法测定样本蛋白含量。

实验细节与注意事项

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收集血液应避免产生溶血现象。红细胞破碎，释放大量的过氧化物酶，会影响ELISA检测中的辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AP）的酶促反应，造成检测结果的不确定性。

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样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃(1个月内检测)，或-80℃(3个月内检测)，避免反复冻融。在检测前，冷冻过的样本应缓慢地融化并离心除去冻融过程产生的沉淀物。室温混匀后使用。

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试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围，建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度并通过预实验确定样本的实际浓度情况。如果样品中待测物浓度过高或过低，请对样本做适当的稀释或浓缩。

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检测样本的稀释推荐多步稀释法，常规稀释检测为血清/血浆检测稀释度为2倍、20倍、200倍；细胞上清稀释度为5倍、50倍、500倍；建议实验前通过相关文献预估样本中待测物的浓度。

对于稀释倍数比较大的检测样本，参考稀释方案如下：

稀释100倍：一步稀释。取5μL样本到495μL标准品/样本稀释液内，做100倍稀释；

稀释1000倍：两步稀释。取5μL样本到95μL标准品/样本稀释液内，做20倍稀释，再取5μL 20倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释1000倍；

稀释100000倍：三步稀释。取5μL样本到195μL标准品/样本稀释液内，做40倍稀释，再取5μL 40倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，最后取5μL 2000倍稀释样本到245μL标准品/样本稀释液内，做50倍稀释，总共稀释100000倍；

每步稀释时取液量不少于3μL，稀释倍数不超过100倍。每步稀释都需混合均匀，避免起泡。

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若所检样本不在说明书所列样本之中，建议做预实验验证其检测有效性。

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若使用化学裂解液制备组织匀浆或细胞提取液，由于引入某些化学物质会导致ELISA测值出现偏差。

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某些重组蛋白可能与试剂盒中捕获或检测抗体不匹配而出现不能检测的情况。

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对于组织匀浆、组织全蛋白、细胞提取液等蛋白提取样本，经BCA法测定样本蛋白含量后，建议进行蛋白浓度的统一化，避免因组织重量、细胞数、产物体积等因素造成的人为误差；例如，统一全部检测样本浓度为1-2mg/mL，进行后续的稀释和检测。

截止2022年初，宁夏可开展辅助生殖技术的医疗机构共有2家，目前设置有人类精子库的仅一家，即宁夏医科大学总医院，是宁夏第一家通过卫生部批准的正规人类精子库，本文整理了2022宁夏精子库医院排名、宁夏捐精流程、宁夏捐精补助费用等信息，为更多不孕不育家庭在有关供精人工授精/试管婴儿医院选择上提供参考。

一、2022宁夏精子库医院排名

2022宁夏精子库医院排名
序号	医院名称	有无精子库	地址
1	宁夏医科大学总医院	有 借卵子做试管	宁夏回族自治区银川市兴庆区胜利街804号
2	银川市妇幼保健院	无	宁夏回族自治区银川市兴庆区文化西街56号

二、2022宁夏精子库捐精流程

在宁夏精子库捐精要求供精者必须是中国公民，必须达到供精者健康检查的标准，捐精流程主要包括筛查阶段、采精阶段和检疫三个阶段，大约需要8个月左右的时间，相对集中的阶段在2-3个月，以下是宁夏精子库捐精流程图：

根据国家卫生部的规定，一个供精者只能向一个精子库提供精子，所有志愿者在签署知情同意书后应进行详细的评估和筛选，初步条件合格后，还必须接受进一步的检查（包括精液检查、血液检查、体检等）。只有达到健康检查标准，才能成为供精者。

三、2022宁夏精子库捐精补助

在宁夏医科大学总医院人类精子库完成整个捐精流程后，可获得约5000元的总补贴。所有捐精所需检查都是免费的，并且还提供免费的生殖健康咨询和健康体检，包括乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病和染色体等，补助分次发放，一般半年内可以完成，大部分志愿者只要3、4个月就能完成。

此外，每次捐精都会给予一定的营养补偿费和交通补助费。具体费用是，在初步检查期间，每次将获得50元的交通补助费，在成为合格的捐精者后，每次将获得300元的交通补助费和误工补助费。一般来说，需要捐精8-10次，经过六个月HIV复查合格后，将获得2500元的补助费，总补助约为5000元。同时，将为通过筛查的志愿者提供免费体检。

以上就是“2022宁夏精子库医院排名，附宁夏捐精流程、补助费用全攻略”的全部内容了，一般来说，做供精试管需要满足一定的条件。例如，男性患有不可逆的无精子症、严重的少弱精子症等。小编提醒大家，在宁夏做供精试管都需要提前排队预约，因为我国精子库数量有限，供不应求，因此等待精源需要很长时间。

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